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Single-Strand DNA Binding Protein

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货号

SSB02200

规格

200 μg

存储温度

-20℃

所属分类

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产品详情

Single-Stranded DNA Binding Protein (SSB), E. coli

应用

通过DNA寡核苷酸的“夹板”作用，阻止限制性内切酶消化克隆的单链DNA酶切位点.1
增加PCR的特异性和产量.2
提高具有较强的二级结构的DNA测序结果.3
与RecA蛋白一起使用进行定点诱变.4
提高DNA聚合酶的持续合成能力.
DNA修复和重组研究.
通过MiniV™ RNA聚合酶转录单链DNA模板.

E. coli Single-Strand DNA Binding Protein (SSB) 能够高特异性结合单链DNA.5,6在体内，该蛋白参与DNA复制、重组和修复。在体外，SSB可以通过解除DNA的二级结构增加聚合酶的持续合成能力。
E. coli SSB在以单链DNA为模板，使用MiniV™ RNA聚合酶进行体外转录过程中十分必要。MiniV™ RNA聚合酶是一个N4病毒RNA聚合酶的具有转录活性的1106个氨基酸.7 MiniV RNA聚合酶缺少对RNA:DNA杂交体的链置换和解旋活性，因此需要 E. coli SSB蛋白从DNA模板上置换RNA转录物完成体外转录.8
储存缓冲液: 50%甘油含有50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 0.1 mM EDTA, 0.1 M NaCl, 1 mM DTT和0.1% Triton® X-100.
质量控制: Single-Stranded DNA Binding Protein不含内切核酸酶、DNA酶和RNA酶活性。单链结合蛋白的活性通过单链M13mp18 DNA的凝胶阻滞分析进行测试和确认(Fig. 1).

Figure 1. SSB有效结合单链DNA.逐渐增加的SSB与1 µg的单链M13mp18 DNA在50-µl反应体系中孵育37°C，30分钟.每个反应取 10-µl进行电泳分析，SSB的效果通过DNA迁移性的降低来观察. Lane 1, M13mp18 DNA不加SSB; lane 2, 0.1 µg/µl SSB; lane 3, 0.05 µg/µl SSB; lane 4, 0.025 µg/µl SSB.

References

Milavetz, B. (1989) Nucleic Acids Res.17, 3322.
Schwarz, K. et al. (1990) Nucleic Acids Res.18, 1079.
Kowalczykowski, S.C. et al. (1981) The Enzymes, 3rd ed., Academic Press, New York, NY, 14, 373.
Shortle, D. (1980) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 69, 3537.
Krauss, G. et al. (1981) Biochemistry20, 5346.
Weiner, J.H. et al. (1975) J. Biol. Chem.250, 1972.
Kazmierczak, K. M. et al. (2002) EMBO J.21, 5815.
Davydova, E. K. and Rothman-Denes, L. B. (2003) Proc. Natl. Acad. Sci. USA100, 9250.

Catalog No.	Concentration	Size

Single-Stranded DNA Binding Protein (SSB)
SSB02200	2 mg/ml	200 µg

010-88891086

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