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Single-Strand DNA Binding Protein

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Single-Strand DNA Binding Protein

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产品名称:

Single-Strand DNA Binding Protein

货号
SSB02200
规格
200 μg
存储温度
-20℃
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产品描述

Single-Stranded DNA Binding Protein (SSB), E. coli


应用
  • 通过DNA寡核苷酸的“夹板”作用,阻止限制性内切酶消化克隆的单链DNA酶切位点.1
  • 增加PCR的特异性和产量.2
  • 提高具有较强的二级结构的DNA测序结果.3
  • 与RecA蛋白一起使用进行定点诱变.4
  • 提高DNA聚合酶的持续合成能力.
  • DNA修复和重组研究.
  • 通过MiniV™ RNA聚合酶转录单链DNA模板.

E. coli Single-Strand DNA Binding Protein (SSB) 能够高特异性结合单链DNA.5,6在体内,该蛋白参与DNA复制、重组和修复。在体外,SSB可以通过解除DNA的二级结构增加聚合酶的持续合成能力。
E. coli SSB在以单链DNA为模板,使用MiniV™ RNA聚合酶进行体外转录过程中十分必要。MiniV™ RNA聚合酶是一个N4病毒RNA聚合酶的具有转录活性的1106个氨基酸.7 MiniV RNA聚合酶缺少对RNA:DNA杂交体的链置换和解旋活性,因此需要 E. coli SSB蛋白从DNA模板上置换RNA转录物完成体外转录.8
储存缓冲液: 50%甘油含有50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 0.1 mM EDTA, 0.1 M NaCl, 1 mM DTT和0.1% Triton® X-100.
质量控制Single-Stranded DNA Binding Protein不含内切核酸酶、DNA酶和RNA酶活性。单链结合蛋白的活性通过单链M13mp18 DNA的凝胶阻滞分析进行测试和确认(Fig. 1).

http://www.epibio.com/images/default-source/product-page-images/g_sstranddna_ssbefficiency.jpg?sfvrsn=0.8371242282131444

Figure 1. SSB有效结合单链DNA.逐渐增加的SSB与1 µg的单链M13mp18 DNA在50-µl反应体系中孵育37°C,30分钟.每个反应取 10-µl进行电泳分析,SSB的效果通过DNA迁移性的降低来观察. Lane 1, M13mp18 DNA不加SSB; lane 2, 0.1 µg/µl SSB; lane 3, 0.05 µg/µl SSB; lane 4, 0.025 µg/µl SSB.

References

  • Milavetz, B. (1989) Nucleic Acids Res.17, 3322.
  • Schwarz, K. et al. (1990) Nucleic Acids Res.18, 1079.
  • Kowalczykowski, S.C. et al. (1981) The Enzymes, 3rd ed., Academic Press, New York, NY, 14, 373.
  • Shortle, D. (1980) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 69, 3537.
  • Krauss, G. et al. (1981) Biochemistry20, 5346.
  • Weiner, J.H. et al. (1975) J. Biol. Chem.250, 1972.
  • Kazmierczak, K. M. et al. (2002) EMBO J.21, 5815.
  • Davydova, E. K. and Rothman-Denes, L. B. (2003) Proc. Natl. Acad. Sci. USA100, 9250.

 

Catalog No. Concentration Size

Single-Stranded DNA Binding Protein (SSB)
SSB02200 2 mg/ml 200 µg

 

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