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进口试剂

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T5 Exonuclease

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产品名称:

T5 Exonuclease

货号
T5E4111K
规格
1,000 U @ 10 U/μl
存储温度
-20℃
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产品描述

T5 Exonuclease
应用

  • 质粒诱变方法。
  • 寡核苷酸定点诱变。
  • 产生质粒测序模板。
  • 去除碱为基础的质粒纯化中变性DNA,以提高克隆效率。1
  • 增强来自质粒cDNA文库获得的微量制备物的转染效率。5

T5核酸外切酶是一种高效的5'→3'核酸外切酶,适用于单链DNA或双链DNA。它有一个单链特异性内切核酸酶的活性,这种活性需要在1〜10毫米的镁离子的存在下使用。此活性可通过使用低浓度的镁离子(<1毫米)选择性抑制,可以使缺口的双链环状DNA形成单链环状。T5核酸外切酶的体内作用方式与类似于大肠杆菌 DNA聚合酶I的5'→3'外切酶活性。在缺乏二价金属辅因子,T5核酸外切酶通过双链DNA区域的单链臂能与DNA结合。 
单位定义:一个单位的T5核酸外切酶定义为标准条件下,37度30分钟内催化双链小牛胸腺DNA释放1 nmol酸性可溶核苷酸所需酶量。 
储存缓冲液:50mM的Tris-HCl(pH值7.5)含 50%甘油,0.1mM的EDTA,1mM的DTT,0.1M NaCl和0.1%的Triton®X-100。 
10X反应缓冲液: 330毫摩尔Tris-醋酸盐(pH 7.5),660 mM的醋酸钾,100mM的醋酸镁,和5.0 mM的DTT。 
质量控制: T5核酸外切酶未检测到RNA酶或污染的DNA内切酶活性。 
参考文献

  • Sayers, J.R. et al. (1996) Anal. Biochem. 241, 186.
  • Sayers, J.R. and Eckstein, F. (1990) J. Biol. Chem. 265, 18311.
  • Sayers, J.R. and Eckstein, F. (1991) Nucleic Acids Res. 19, 4127.
  • Garforth, S.J. and Sayers, J.R. (1997) Nucleic Acids Res. 25, 3801.
  • Kiss-Toth, E., Dower S.K., and Sayers J.R. (2001) Anal. Biochem. 288, 230.

 

Catalog No. Concentration Size

T5 Exonuclease
T5E4111K 10 U/µl 1,000 Units
Includes 10X Reaction Buffer.

 

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