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进口试剂

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Direct Lysis Fosmid96 DNA Purification Kit

进口试剂

Direct Lysis Fosmid96 DNA Purification Kit

浏览量
产品名称:

Direct Lysis Fosmid96 DNA Purification Kit

货号
FOS84596
规格
5 x 96 well preps
存储温度
Room Temperature
没有此类产品
产品描述

Direct Lysis Fosmid96 DNA Purification Kit
直接裂解fosmid 96孔式DNA 纯化试剂盒

Overnight culture:
Add lysis buffer; mix.
Add neutralization buffer; mix.

No cell harvesting.
No use of deep-well
culture plate.

 

Clear the lysate:
Vacuum filtration or
centrifugation, 1 min.

 

 

Precipitate the DNA:
Centrifuge, 10 min.
Wash with 70% EtOH, 5 min.
Resuspend the DNA.

1. 直接裂解fosmid 96孔式DNA 纯化过程概述

  应用:

  • 快速,直接裂解制备96孔格式的fosmid DNA 用于测序反应。

直接裂解fosmid 96孔式DNA 纯化试剂盒可直接裂解200ul过夜培养物分离fosmid DNA。省去了将细胞培养物沉淀(图1)和再悬浮的离心分离。该试剂盒主要用于从fosmid克隆的96孔格式快速制备测序的模板(见图2和3)。试剂盒使用了一个改性碱裂解过程,包括专有的RNA酶混合液来有效地除去RNA和自诱导溶液,可以在使用CopyControl™fosmid克隆时获得更高的细胞生长和DNA产量。从200μL过夜自诱导的fosmid克隆培养物中获得的DNA量足够6到8次末端测序反应。
所述试剂盒包括用于高通量DNA提取的试剂和塑料板,并适用于机器人自动化过程。
好处

  • 无需收获细胞及沉淀重新悬浮。
  • 培养物在200μl体积接种,省去了使用2毫升深孔培养板。
  • 与标准的每次1.2ml,总培养基使用量115ml相比,把每个板子所使用的培养基量减少至20毫升。
  • 最终DNA悬液体积低(25μL)。
  • 操作时间25分钟。
  • 在自诱导fosmid(40-kb的)的克隆中,用700-900个碱基(图3)的平均读长执行6至8个最终测序反应。
  • 低过滤器 - 接收器板块(H57 x L127 x W85毫米)。

2. 限制酶分析使用直接裂解fosmid 96孔式DNA 纯化试剂盒制备的fosmidDNA
从fosmid文库中随机选择克隆进行Not I消化,琼脂糖电泳分析DNA。泳道M, Kilobase ladder; 泳道1, 40-kb 对照插入片段; 泳道2-19, Not I-消化的fosmid DNA.

3. 测序分析证明fosmidDNA质量。
使用自诱导pCC1™ fosmid 克隆的4ulDNA及pCC1Fos反向测序引物测序。ABI® 3730测序分析仪分析。


产品名称及编号     规格
Direct Lysis Fosmid96 DNA Purification Kit
FOS84596 5 x 96-well preps
试剂盒包含: Culture plates, 96-well fritted filter plates, collection plates, plate sealers, gas-permeable sealers, reagents for five 96-well preps.
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