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Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, Recombinant

进口试剂

Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, Recombinant

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产品名称:

Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, Recombinant

货号
TDT11725K
规格
2,500 U @ 20 U/μl
存储温度
-20° C
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产品描述

Terminal deoxynucleotidyl Transferase, Recombinant
末端脱氧核苷酰转移酶

 

应用:

  • 在DNA分子的3'-OH末端添加多聚物尾巴。
  • 用修饰核苷酸标记DNA 3'端,如ddNTP,DIG-dUTP标记。
  • TUNEL测定(原位细胞凋亡的定位)。
  • 末端转移酶依赖的PCR检测。
  • 拖尾模板为单分子测序。

末端脱氧核苷酸转移酶()催化DNA分子的3'-OH末端添加单核苷酸。不同于所有其他已知的DNA聚合酶, TdT催化的DNA合成没有模板指导。只需要有一个dNTP的聚合,尽管任何的dNTP(和衍生物)或一种dNTP的任何组合将作为底物1。突起,凹陷,或钝端的单链DNA或双链DNA分子将作为底物。在58.3 kDa的酶不具有5'-或3'-核酸外切酶的活性。添加Co 2 +,使尾部作用更加高效。

酶提供500和2500个单位,浓度为20 U /μL,同时提供10X反应缓冲液和2.5mM氯化钴

储存: -20℃的冰箱
储存缓冲液:50mM的Tris-HCl(pH 7.5)中含50%甘油,0.1M的NaCl,0.1mM的EDTA,1mM的DTT和0.1%的Triton®X-100。
单位定义: 1单位的酶定义为在37℃下使用寡核苷酸作为引物,在酸不溶介质中整合1 nmol dATP所需酶量。
活性测定: TdT酶活是在10μl的反应体系中测试的,该体系含有33毫摩尔Tris醋酸盐(pH 7.5),66 mM的醋酸钾,10mM的醋酸镁,0.5mM的DTT,1mM的的dATP,0.25mM的氯化钴,2 µM 20-mer DNA oligo和不同量的酶。
资料来源:大肠杆菌菌株携带从小牛胸腺克隆的末端转移酶基因。
末端转移酶10X反应缓冲液: 330毫摩尔Tris-醋酸盐(pH 7.5),660 mM的醋酸钾,100mM的醋酸镁,和5mM DTT。
储存缓冲液: 50mM的Tris-HCl(pH 7.5)中含50%甘油,0.1M的NaCl,0.1mM的EDTA,1mM的DTT和0.1%的Triton®X-100。
污染活性测定:末端转移酶是无外切和内切酶和RNA酶的活性。

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