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Ribonuclease R (RNase R)

进口试剂

Ribonuclease R (RNase R)

浏览量
产品名称:

Ribonuclease R (RNase R)

货号
RNR07250
规格
250 U
存储温度
-20℃
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产品描述

RNase R


应用
  • 可变剪切和基因表达研究.
  • 内含子的cDNA获得.
  • cDNA文库的内含子筛选

来源于大肠杆菌的核糖核酸酶R (RNase R) 是一种镁依赖性的3'→5'核糖核酸外切酶,能够消化基本上所有线性的RNA,但不易消化套索或环状RNA的结构,或3'突出超过7个核苷酸短双链RNA。大多数细胞的RNA会被RNase R消化完全,除tRNA基因,5S RNA和内含子套索结构(图1)。3’套索尾巴将被RNase R修剪到分支点的核苷酸,此位置含有一个2',5'-磷酸二酯键。套索是内含子区域的前体mRNA剪接产生的,并且可以从总RNA的混合物通过RNase R消化进行分离。ArrayPure™ Kit, MasterPure™ RNA和Yeast RNA Purification试剂盒可被用于这种总RNA的制备。
用这种方法分离的RNA可以用作模板来产生标记的cDNA作为含有潜在的内含子序列的微阵列的目标,或者用于包含完整的染色体或基因组的重叠区域平铺阵列。产生的cDNA不代表线性内含子,但其含有的序列是来源于内含子的。
活力单位定义: 在标准反应条件下,一个活力单位的RNase R能够在37°C,10分钟将1 µg的 poly(A)转变成可溶于酸的核苷。
储存缓冲液: RNase R储存于50%甘油含有50 mMTris-HCl (pH 7.5), 100 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, and 0.1% Triton® X-100.
RNase R 10X反应缓冲液: 0.2 M Tris-HCl (pH 8.0), 1 M KCl, and 1 mM MgCl2.
: RNase R的活性需要低的镁离子浓度 (0.1-1.0 mM)RNA制备物中低浓度的EDTA会影响RNase R的活性。加入最多至1 mMMgCl2可以竞争EDTA.该酶最适温度为37°C.

http://www.epibio.com/images/default-source/product-page-images/i_rnase_intronlariats.gif?sfvrsn=0.42854755297897684
Figure 1. RNase R处理内含子套索过程示意图。

质量控制: RNase R的功能通过反应中加入线性和环状的RNA寡核苷酸混合物进行测试;只有线性RNA会被降解。

   
 

 

 

 

 

References

  1. Suzuki, H. et al. (2006) Nucleic Acids Res. 34, 63.
  2. Vincent, H.A. and Deutscher, M. P. (2006) J. Biol. Chem. 281, 29769.

 

Catalog No. Concentration Size

RNase R
RNR07250 20 U/µl 250 Units

Provided with a 10X Reaction Buffer.                                      

 

 

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