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CircLigase™ ssDNA Ligase

进口试剂

CircLigase™ ssDNA Ligase

浏览量
产品名称:

CircLigase™ ssDNA Ligase

货号
CL4115K
规格
5,000 U
存储温度
-20℃
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产品描述

CircLigase™ ssDNA Ligase
应用

  •  产生单链DNA模板用于滚环复制或者滚环转录实验。
  •  产生单链DNA模板用于RNA聚合酶和RNA聚合酶抑制剂测定。

CircLigase™ II ssDNA Ligase是一个热稳定性酶,催化具有5'-磷酸和3'-羟基基团的单链DNA模板的分子内连接(即环化)。与T4 DNA Ligase和Ampligase® DNA Ligase不同(连接彼此相邻的互补的DNA序列的末端)CircLigase II ssDNA Ligase可以在没有互补序列存在的情况下连接单链DNA末端。因此,该酶在将线性单链DNA连接成环状单链DNA中具有重要作用。环状的单链DNA分子可被用作滚环复制或滚环转录研究的底物。
大于30个碱基的线性单链DNA,包括cDNA,均可被CircLigase II enzyme环化。标准反应条件下,不产生线性或环状的嵌合体结构。除了对单链DNA具有活性,CircLigase II也在具有3'-羟基核糖核苷酸和5'-磷酸化的核糖核苷酸或脱氧核糖核苷酸的单链核酸的连接中具有活性的活性。


活力单位定义: 一个活力单位的CircLigase II酶在标准反应条件下,60°C ,1小时能够将1 pmol的线性 5´-磷酸化的标准55-mer寡核苷转换成抵抗外切酶I的环状形式。
储存缓冲液: 50%甘油含有50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 100 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT和0.1% Triton® X-100。
10X反应缓冲液: 0.33 M Tris-乙酸盐(pH 7.5), 0.66 M醋酸钾和5 mM DTT。该反应缓冲液不含ATP和MnCl2, 需要额外添加, 终浓度为 0.05 mM ATP 和2.5 mM MnCl2。试剂盒提供2.5-mM  ATP和50-mM MnCl2。
质量控制: CircLigase II ssDNA Ligase不含磷酸酶、DNA外切、内切和RNA酶活性。
Product Citations
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Figure 1. CircLigase™ II ssDNA Ligase将线性单链DNA转换成环状单链DNA. A 71个碱基的单链DNA寡核苷在含有CircLigase™ II ssDNA Ligase和ATP的反应体系中被转换成环状DNA。Lane 1, DNA markers. Lane 2, 71个碱基的单链DNA. Lane 3, 环化经过腺甘酸化的中间体. Lane 4, 闭合环状的DNA通过专门切割线性DNA的外切核酸酶I进行验证。

 

  Catalog No. Size

CircLigase™ ssDNA Ligase
   CL4111K 1,000 Units
   CL4115K 5,000 Units
Contents: CircLigase™ ssDNA Ligase, CircLigase™ 10X Reaction Buffer, 1 mM ATP, 50 mM MnCl2, CircLigase™ ssDNA Control Oligo, Sterile Water.

 

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