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Exonuclease III

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产品名称:

Exonuclease III

货号
EX4425K
规格
25,000 U @ 200 U/μl
存储温度
-20℃
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产品描述

Exonuclease III, E. coli
应用

  • 生产定点诱变的中间产物。1-3
  • 生产链特异性标记的探针。4

外切酶II从I3'→5'消化双链DNA形成一个缺口,一个平端,或3'-端凹进末端,在相对链产生单链DNA。5,6在指定的反应条件下,通过核酸外切酶III降解的DNA形成可预测和可重复的消化结果。
因为由脱氧核糖核酸外切酶III的核酸切除的速率取决于反应的因素,包括温度,离子强度,模板序列和酶与DNA的比例,4,7每个模板用样品消化来进行优化,以达到预期的切除率。
核酸外切酶III在以下情况下不具有活性,3'-端突出4个碱基或以上的长度,单链DNA,或硫酯连接的核苷酸,酶也具有固有的RNA酶H,3'-DNA的磷酸酶,和脱嘌呤核酸内切酶活性。
单位定义:外切核酸酶III的一个单位定义为标准条件下,37℃30分钟,从双链小牛胸腺DNA催化释放1nmol的酸溶核苷酸所需要的酶量。
储存缓冲液: 50mM的Tris-HCl(pH 7.5)含50%甘油,0.1M的NaCl,0.1mM的EDTA,1mM的DTT和0.1%的Triton?X-100。
外切酶III 10X反应缓冲液: 330毫摩尔Tris-醋酸盐(pH 7.5),660 mM的醋酸钾,100mM的醋酸镁,和5mM DTT。
质量控制:外切核酸酶III未检测到外源性核糖核酸酶,核酸内切酶和单链核酸外切酶的活性。
参考文献

  • Sambrook, J. et al. (1989) in: Molecular Cloning: A Laboratory Manual (2nd ed.), Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York.
  • Vandeyar, M.A. (1988) Gene 65, 129.
  • Luckow, B. et al. (1987) Nucleic Acids Res. 15, 417.
  • Richardson, C.C. et al. (1964) J. Biol. Chem. 239, 251.
  • Weiss, B. (1976) J. Biol. Chem. 251, 1896.
  • Rogers, S.G. and Weiss, B. (1980) Meth. Enzymol. 65, 201.
  • Guo, L.H. and Wu, R. (1982) Nucleic Acids Res. 10, 2065.
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