QQ:1443274331

010-88891086,80794780

服务电话:

搜索

 北京市昌平区北清路生命科学园北清创意园2-3-102;  Tel:010-88891086,80794780   Fax:010-80794780 
咨询订购QQ: 1443274331   技术支持QQ: 2074750152   邮件订购:bjzblg@126.com      
www.epibio.com.cn  www.epicentre.cn  www.immunoreagents.cn  www.lucigen.com.cn
版权所有 @北京中北林格科技发展有限公司   
京ICP备:13002510号       网站建设:中企动力 北京

进口试剂

>
>
>
>
EpiScript™ Reverse Transcriptase

进口试剂

EpiScript™ Reverse Transcriptase

浏览量
产品名称:

EpiScript™ Reverse Transcriptase

货号
ERT12925K
规格
存储温度
没有此类产品
产品描述

由于生产线调整,自2017年1月1日起,此款产品转至Lucigen™品牌销售, (仅品牌变化,产品外包装变化,本身没有改变,老客户可以继续使用,实验不受影响)

EpiScript™ Reverse Transcriptase
应用

  • 第一链cDNA合成用于后续的PCR或实时PCR .

EpiScript™ Reverse Transcriptase (EpiScript RT)(除SuperScript® II Reverse Transcriptase的另外一种选择)是一种重组的MMLV反转录酶降低了RNase H的活性。该酶能够高效从长的RNA模板和成全长的cDNA。EpiScript RT证明比其他MMLV逆转录酶具有明显高的活性。该酶能够从低至50 pg的总RNA合成cDNA用于RT-PCR (qRT-PCR) 和其它分析。
该酶有25,000和50,000个活力单位两种规格,浓度为200 U/µl。随酶提供10X反应缓冲液和100 mM DTT.
储存: -20°C储存,避免反复冻融。
储存缓冲液: EpiScript RT储存在50%甘油含有50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 100 mM氯化钠, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA和0.1% Triton® X-100缓冲液中。
活力单位定义: 使用饱和量的寡聚dT引发的聚合A(rA)为模板,一个活力单位的EpiScript RT能够在37°C,10分钟内催化1 nmol的dTTP整合到酸不溶的物质。
污染活性分析: EpiScript RT不含外切、内切核酸酶和RNA酶活性。
Figure 1
Figure 1. EpiScript™ Reverse Transcriptase与其它供应商的反转录酶在第二条链的qPCR反应中表现同样效果甚至优于其它酶。第一条链合成组装根据供应商的说明完成。起始RNA为1 µg的Jurkat细胞株总RNA (Ambion®)。反应以50 ng的poly-T(16-18) DNA作为引物。第二条链的qPCR使用Bio-Rad iQ SYBR mastermix试剂盒和基因特异的引物完成,产生250-350 bp的扩增片段。每个反应重复4次。四个基因分别为PGDF-R (Platelet Derived Growth Factor Receptor), TNF (Tumor Necrosis Factor), IL-1b (Interleukin-1 beta)和IL-2 (Interleukin 2)。图片由Matthew Kellinger, Illumina® Inc提供。

 

Figure 2. EpiScript™ Reverse Transcriptase不依赖转录本长度产生相似的转录本覆盖率。EpiScript通过随机引物将oligo-dT或polyA+选择的RNA合成cDNA第一条链。cDNA被制备成 Illumina®兼容的文库后进行测序。根据测序覆盖度和转录本长度进行映射。0% 指5´端,100 %指3´端。寡聚dT为引物的结果由于随机引物的结果。

Figure 3

Figure 3. 使用EpiScript® Reverse Transcriptase能够获得相似的转录本分类,不依赖于起始RNA量。用EpiScript RT以5 ng or 50 pg人总RNA合成cDNA,然后进行Illumina®测序。序列比对和注释结果以饼图显示。以5 ng和50 pg起始RNA为模板,最终结果一致。

 

未找到相应参数组,请于后台属性模板中添加
暂未实现,敬请期待
暂未实现,敬请期待
上一篇
下一篇