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EZ-Tn5™ <KAN-2> Insertion Kit

进口试剂

EZ-Tn5™ Insertion Kit

浏览量
产品名称:

EZ-Tn5™ <KAN-2> Insertion Kit

货号
EZI982K
规格
10 Rxns
存储温度
-20℃
没有此类产品
产品描述

由于生产线调整,自2017年1月1日起,此款产品转至Lucigen™品牌销售, (仅品牌变化,产品外包装变化,本身没有改变,老客户可以继续使用,实验不受影响)

EZ-Tn5™ <KAN-2>, EZ-Tn5™ <TET-1>, and EZ-Tn5™ <DHFR-1> Insertion Kits
应用:
可完整测序质粒,cosmid, fosmid或BAC载体上的基因组克隆序列或cDNA序列,不需要亚克隆或步移测序。
EZ-Tn5™ Insertion Kits* 可便捷快速的进行>2 kb的DNA克隆测序,不需要亚克隆或步移测序。一步简单体外反应使含有筛选标记(筛选标记可以是卡那霉素,四环素,甲氧氨苄嘧啶)的EZ-Tn5转座子随机插入克隆。然后转化大肠杆菌,筛选标记筛选转座子。使用盒子提供的引物结合在转座子插入位置两侧的引物结合位点,进行双向测序(图1)。
好处

  • 高度的随机性确保了引物结合位点分布于整个克隆,确保比引物步移或亚克隆更好的序列覆盖率
  • 单一反应产生高达10 6个克隆的插入,即使是最大的克隆,也足够测序使用。而且通常比亚克隆,设计和成测序引物节省时间。
  • 使用一组的测序引物(盒子提供)可测序任何克隆。
  • 该EZ-Tn5的系统可以用于处理多个DNA样品,使其成为高通量测序的有效成分。4


图1 使用EZ-Tn5™ Insertion Kit产生DNA测序模板的过程。通过卡那霉素,四环素,甲氧氨苄嘧啶平板选择

 

 

图2.55个随机挑选的EZ-Tn5™ <TET-1>转座插入一个7.8kbDNA的位置图谱,证明了其高度随机性。以50bp长度序列分析GC含量表明转座插入没有GC或AT的偏好性。

图3. EZ-Tn5™转座子插入序列的特征。对5个随机选择的EZ-Tn5 <KAN>转座子插入克隆测序。用红色标出的区域表示了EZ-Tn5转座子19-bp的ME序列,通常位于克隆的EZ-Tn5转座子和靶向序列间。这个序列被用作一个标志区分EZ-Tn5转座子序列和靶序列。

参考文献

  1. Goryshin, I. Y. and Reznikoff , W. S. (1998) J. Biol. Chem. 273, 7367.
  2. Meis, R. (2000) Epicentre Forum 7(4), 5.
  3. Shevchenko, Y. et al. (2002) Nucl. Acids Res. 30, 2469.
  4. Shevchenko, Y. et al. (2001) Epicentre Forum 8(2), 14.
Catalog No.
  Size

EZ-Tn5™ <KAN-2> Insertion Kit
EZI982K 10 Reactions

EZ-Tn5™ <TET-1> Insertion Kit
EZI921T 10 Reactions

EZ-Tn5™ <DHFR-1> Insertion Kit
EZI912D 10 Reactions
Contents: EZ-Tn5™ Transposase,EZ-Tn5™ Transposon,EZ-Tn5™ 10X Reaction Buffer,EZ-Tn5™ 10X Stop Solution,Forward and Reverse Sequencing Primers,Control Target DNA,Sterile Water.

 

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