QQ:1443274331

010-88891086,80794780

服务电话:

搜索

 北京市昌平区北清路生命科学园北清创意园2-3-102;  Tel:010-88891086,80794780   Fax:010-80794780 
咨询订购QQ: 1443274331   技术支持QQ: 2074750152   邮件订购:bjzblg@126.com      
www.epibio.com.cn  www.epicentre.cn  www.immunoreagents.cn  www.lucigen.com.cn
版权所有 @北京中北林格科技发展有限公司   
京ICP备:13002510号       网站建设:中企动力 北京

进口试剂

>
>
>
>
EZ-Tn5™ <KAN-2> Tnp Transposome™ Kit

进口试剂

EZ-Tn5™ Tnp Transposome™ Kit

浏览量
产品名称:

EZ-Tn5™ <KAN-2> Tnp Transposome™ Kit

货号
TSM99K2
规格
10 Std Rxns
存储温度
-20℃
没有此类产品
产品描述

由于生产线调整,自2017年1月1日起,此款产品转至Lucigen™品牌销售, (仅品牌变化,产品外包装变化,本身没有改变,老客户可以继续使用,实验不受影响)

EZ-Tn5™ <KAN-2>Tnp and EZ-Tn5™ <DHFR-1>Tnp Transposome™ Kits
应用

  • 快速生成细菌细胞基因敲除突变体。
  • 敲入基因的细菌菌株进化。
  • “标记”细菌有可见的遗传标记用于环境定位研究。
  • 细菌染色体DNA直接测序。

EZ-Tn5™ Transposome™复合体是由一个EZ-Tn5™转位子和其转座酶构建成,为体内构建基因敲除随机文库提供了简单可靠的方法。只需电转化EZ-Tn5 Transposome至活的细菌细胞中(广谱细菌性),通过EZ-Tn5 Transposome筛选marker来选择(图1)。由于不需要细胞接合,自杀载体及特定细胞因子,EZ-Tn5 Transposomes 对于那些不是很清楚遗传背景及缺乏足够分子操作工具的菌株来创建突变体是很理想的选择。
EZ-Tn5 Transposomes*含有一个卡那霉素筛选标记和二氢叶酸还原酶基因可以在相应平板上做筛选克隆。这些筛选标记容易在革兰氏阴性菌中表达。你也可以应用EZ-Tn5 pMOD™转座子构建载体和转座酶自己构建一个转座复合体。
所有的EZ-Tn5转座子两端都含有一个引物接合位点,可用于双向测序。因此,基因敲除可以直接使用细菌基因组DNA作为模板,并用提供的每个转座体的引物进行测序。使用EZ-Tn5 <R6Kγori/KAN-2>Tnp Transposome Kit可使插入的转座位点被营救(形成可复制的环状质粒),并进行测序。

 

 

图1. EZ-Tn5™ 转座子在细菌的插入位点可直接测序,通过MasterPure™ Complete DNA Purification Kit纯化基因组DNA及转座子两端的同源引物来测序。

通过EZ-Tn5 转座子介导的插入反应在很多微生物中可实现,包括Acinetobactor,弯曲杆菌,埃希氏菌属,分枝杆菌属,变形杆菌属,假单胞菌属,酵母属,沙门氏菌属,锥虫属,Xylella,及其他菌。得到的转座的克隆数是高度依赖于宿主细胞(表1)的转化效率。

好处

  • 快速的突变过程,比化学诱变更简单,更容易。
  • 比使用mini-转座子与自杀质粒更高效。
  • 广泛的宿主范围:超过60种革兰阴性和革兰氏阳性菌。
  •  

Table 1.使用 EZ-Tn5™ Tranposomes™转座子突变细菌菌株案例。

Actinobacillus pleuropneumoniae
Agrobacterium tumefaciens
Bacillus subtilis
Bartonella henselae
Bdellovibrio bacteriovorus
Campylobacter jejuni
Clavibacter michiganensis
    
subsp. sepedonicus
Corynebacterium diphtheriae
Enterobacter cloacae
Escherichia coli
Francisella tularensis
Haemophilus ducreyi
Moraxella catarrhalis
Mycobacterium avium
Mycobacterium bovis 
(BCG)

Mycobacterium tuberculosis
Myxobacterium angiococcus
Neisseria gonorrhoeae
Pseudomonas putida
Pseudomonas syringae
Rhodococcus equi
Rickettsia prowazekii
Salmonella typhimurium
Serratia marcesens
Silicibacter pomeroyi
Spiroplasma citri
Streptococcus pyogenes
Xanthomonas campestris
Xylella fastidiosa
Zymomonas mobilis

Table 2. 使用 EZ-Tn5™ <KAN>Tnp Transposome™转座子1ul进行电转所得到的转化子数。

E. coli

>105

Proteus vulgaris

>103

Salmonella ty.

>104

Mycobacterium smegmatis

>102

Pseudomonas sp.

>102

 

 

 

Catalog No. Size

EZ-Tn5™ <KAN-2>Tnp Transposome™ Kit
TSM99K2 10 Reactions

EZ-Tn5™ <DHFR-1>Tnp Transposome™ Kit
TSM99D1 10 Reactions
Contents for all kits: Ready-to-use Transposome™ complex with either a KAN-2 or DHFR-1 marker, and forward and reverse primers for sequencing.

 

未找到相应参数组,请于后台属性模板中添加
暂未实现,敬请期待
暂未实现,敬请期待
上一篇
下一篇