MMLV Reverse Transcriptase 1st-Strand cDNA Synthesis Kit

MMLV Reverse Transcriptase 1st-Strand cDNA Synthesis Kit


货号

MM070150


规格

50 Rxns


存储温度

-20℃


产品详情


由于生产线调整,自2017年1月1日起,此款产品转至Lucigen™品牌销售, (仅品牌变化,产品外包装变化,本身没有改变,老客户可以继续使用,实验不受影响)

MMLV Reverse Transcriptase 1st-Strand cDNA Synthesis Kit 
MMLV High Performance Reverse Transcriptase


应用
  • 第一链cDNA合成用于后续的PCR或实时PCR 。
  • 通过RT-PCR验证芯片实验的基因表达数据。
  • 通过RT-PCR分析RNA干扰的基因沉默效果。

MMLV High Performance Reverse Transcriptase (MMLV HP RT)和MMLV Reverse Transcriptase 1st-Strand cDNA Synthesis Kit都能够细胞总RNA或纯化的poly(A)尾RNA合成全长的cDNA第一条链。
MMLV HP RT被证实比其它的商品化MMLV RT酶具有更高的活性。典型的,MMLV HP RT只需100个活力单位即可合成全长的cDNA,而其它的MMLV RT酶需要200个活力单位。MMLV HP RT 提供10X的优化的反应缓冲液,有效从长的RNA模板和DTT合成全长cDNA。
优点

  • 能够从长于15kb的RNA模板合成全长的cDNA。
  • MMLV HP RT相比其它反转录酶具有明显高的活性。
  • 已优化的能够产生全长cDNA的反应缓冲液随MMLV HP RT和MMLV Reverse Transcriptase 1st-Strand cDNA Synthesis Kit试剂盒提供。
  • 试剂盒含有寡聚T和随机引物。
  • 第一链cDNA的合成可以从皮克量级的起始RNA开始。
  • 试剂盒含有高效的RNase抑制剂,能够保护模板RNA的完整性。

http://www.epibio.com/images/default-source/product-page-images/g_mmlv_full-length_cdna_from_rna.gif?sfvrsn=0.786200676130578
Figure 1. MMLV HP RT从长于15 kbmRNA合成全长的cDNA从HeLa 细胞的总 RNA反转录合成cDNA并通过PCR扩增。从mRNA 的5´ 端能够扩增1.3-kb的PCR产物,说明HERC1 mRNA的全长被反转录了(A)。电泳分析PCR产物显示1.3 kb的扩增条带(B)。Lane M, 100 bp DNA ladder; lane 1, 没有RT酶的对照反应;lane 2, Epicentre's MMLV HP RT酶合成的cDNA的PCR产物。

目标转录本(大小)

3´/5´ 比例

Epicentre MMLV High Performance Reverse Transcriptase

公司I (RNase H-Mutant of MMLV RT)

公司P(MMLV RT)

ACTB (1,792 b)

0.9

1.7

1.2

GUSB (2,162 b)

1.0

6.1

2.5

TFRC (5,010 b)

5.5

12.1

11.3

Table 1.不同反转录酶合成cDNA3´/5´比例分析。使用三种不同的反转录酶从总HeLa细胞RNA合成cDNA。3´/5´比例为1时表明cDNA的3´和5´端得到了等量的扩增,即从mRNA合成了全长的cDNA。  

2A.http://www.epibio.com/images/default-source/product-page-images/mmlv_i2140703.gif?sfvrsn=0.9753774477053038
Figure 2. 通过Epicentre's MMLV High Performance Reverse Transcriptase合成的cDNA,与其它公司的酶相比具有更好的3´/5´比例。 约2160个碱基的HeLa β-葡萄糖醛酸酶mRNA (GUSB)通过 Epicentre's MMLV High Perfomance Reverse Transcriptase和两个其它的反转录酶转录成cDNA。定量PCR检测GUSB cDNA的3´和5´末端 (SYBR® Green I 染料检测)。(A). 从GUSB cDNA的3´端和5´进行扩增。(B). 图像显示qPCR定量检测Epicentre's MMLV High Performance Reverse Transcriptase Kit试剂盒和其它两个商品酶合成cDNA后的3´和5´扩增子。


5'-amplicon


3'-amplicon

2B.
Epicentre MMLV 1st-Strand cDNA Synthesis Kit
http://www.epibio.com/images/default-source/product-page-images/c1870703.gif?sfvrsn=0.30550802172287694
公司I RNase H- minus MMLV RT
http://www.epibio.com/images/default-source/product-page-images/c1880703.gif?sfvrsn=0.872632540076658
公司PMMLV RT
http://www.epibio.com/images/default-source/product-page-images/c1890703.gif?sfvrsn=0.1669705603259951

 

 Catalog No. Concentration Size

MMLV Reverse Transcriptase 1st-Strand cDNA Synthesis Kit
   MM070110   10 Reactions
   MM070150   50 Reactions
Contents: MMLV Reverse Transcriptase, 10X Reaction Buffer, ScriptGuard™ RNase Inhibitor, dNTP PreMix, DTT,
Oligo(dT)21 Primer, Random 9-mer Primers, RNase-free Water.

MMLV High Performance Reverse Transcriptase
   RT80110K 200 U/µl 10,000 Units
   RT80125K 200 U/µl 25,000 Units