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Poly(A) Polymerase Tailing Kit
Poly(A) Polymerase Tailing Kit
货号
PAP5104H
规格
50 Rxns
存储温度
-20℃
产品详情
Poly(A) Polymerase Tailing Kit
应用：
- 体外RNA合成时添加poly(A)尾巴，用于增加RNA的稳定性，同时提高转染体内或显微注射到真核细胞后，被翻译后的稳定性。
- 给RNA分子或RNA分子混合物添加polyA尾巴，为了在cDNA合成第一条链时，提供一个引物位点，可以和3´ 端polyT互补。
- 合成的聚腺苷酸化的RNA用于核酸扩增方法或基因表达的研究。
- 用放射性A残基3'末端标记RNA。
- 定量mRNA。5
poly（A）聚合酶使用ATP作为底物, 对RNA分子的3'-羟基末端以模板依赖形式添加磷酸腺苷。The Poly(A) Polymerase Tailing Kit提供了酶和其他试剂快速，方便地在任何RNA的3'端添加多聚（A）尾巴。多聚（A）聚合酶是由一个大肠杆菌编码的，该基因已被克隆到质粒并在大肠杆菌菌株中过表达。
优点
- 高纯度酶，特异性和活性。
- 简便，快速，高效的给RNA进行poly（A）加尾（图1）。
单位定义：一单位的poly（A）聚合酶定义为，标准反应条件下，在37℃，10分钟内催化的1纳摩尔AMP形成酸不溶性形式。
储存缓冲液： 50％的甘油含有50mM的Tris-HCl（pH为7.5），100mM的氯化钠，1mM的DTT，0.1mM的EDTA和0.1％的TRITON X-100。
10X反应缓冲液： 0.5M的的Tris-HCl（pH为8.0），2.5M NaCl和100毫米MgCl 2。单独提供一个10毫摩尔ATP溶液
质量控制：Poly(A)聚合酶体外进行RNA的多聚腺苷酸化测试。未检测到外切和内切酶及RNA酶的活性。
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图1. 使用Poly(A) Polymerase Tailing Kit添加的RNA Poly(A) 尾。AmpliCap-Max™ 体外转录加帽反应的终产物（60微克的1760个碱基的荧光素酶RNA）用8单位polyA聚合酶处理图中所示时间。对于每个样品，取0.1ug进行1%琼脂糖甲醛凝胶分析。
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参考文献
References
- Drummond, D.R. et al. (1985) J. Cell. Biol. 100, 1148.
- Galili, G. et al. (1988) J. Biol. Chem. 263, 5764.
- Belasco, J. and Brawerman, G. (1993) Control of Messenger RNA Stability, Academic Press, San Diego, CA.
- Lingner, J. and Keller, W. (1993) Nucleic Acids Res. 21, 2917.
- Krug, M.S. and Berger, S.L. (1987) Methods Enzymol. 152, 262.
- Gething, M. et al. (1980) Nature 287, 301
| Catalog No. | Size |
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| Poly(A) Polymerase Tailing Kit | |
| PAP5104H | 50 Reactions (400 Units) |
| Contents: Poly(A) Polymerase, 10X Reaction Buffer, 10 mM ATP,Sterile RNase-Free Water. | |
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