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RNA 5' Polyphosphatase
RNA 5' Polyphosphatase
货号
RP8092H
规格
200 U
存储温度
-20℃
产品详情
RNA 5´ Polyphosphatase
应用
- 将5´三磷酸化的RNA转换成5´单磷酸化的RNA用于T4 RNA Ligase的5´-RNA加标签反应 。
- 分析RNA的5´末端结构。
- 制备底物RNA分子用于后续的Epicentre's Terminator™ 5´-Phosphate-Dependent Exonuclease的降解反应。
RNA 5´ Polyphosphatase是Epicentre科学家发现和表征的一个Mg2+依赖的磷酸水解酶。该酶能够顺序的从5´三磷酸化的RNA (如初级RNA转录本)移除γ和β磷酸基:
5´ pppN—OH 3´ → 5´ pN—OH 3´ + 2 Pi
带有5´-双磷酸化末端的RNAs也可以通过RNA 5´ Polyphosphatase被转化成5´-单磷酸酶化的RNA:
5´ ppN—OH 3´ → 5´ pN—OH 3´ + Pi
RNA Polyphosphatase对含有5´帽子(例如, 5´ m7GpppN—OH 3´)或5´单磷酸化尾(5´ pN—OH 3´)的RNA没有活性。但是NTPs和dNTPs都是该酶的底物,产生相应的NMPs和dNMPs + 无机磷: (d)NTP → (d)NMP + 2Pi
活力单位定义: 标准反应条件下,37°C,1个小时,一个活力单位的RNA 5´ Polyphosphatase能够从ATP释放1 nmol的无机磷。
储存缓冲液: 50%甘油含有0.05 M Tris-HCl (pH 7.5), 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.1 M NaCl和0.1% Triton® X-100.
10X反应缓冲液: 0.5 M HEPES-KOH (pH 7.5), 1 M NaCl, 10 mM EDTA, 1% β-巯基乙醇和0.1% Triton® X-100.
失活/抑制剂:以ATP为底物,100 mM 的无机磷能够抑制50%的RNA 5´ Polyphosphatase活性。
质量控制: RNA 5´ Polyphosphatase不含DNA外切、内切核酸酶和RNase的活性。
Catalog No. | Concentration | Size |
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RNA 5´ Polyphosphatase | ||
RP8092H | 20 U/µl | 200 Units |
Includes 10X Reaction Buffer. |