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Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, Recombinant
Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, Recombinant
货号
TDT11725K
规格
2,500 U @ 20 U/μl
存储温度
-20° C
产品详情
Terminal deoxynucleotidyl Transferase, Recombinant
末端脱氧核苷酰转移酶
应用：
- 在DNA分子的3'-OH末端添加多聚物尾巴。
- 用修饰核苷酸标记DNA 3'端，如ddNTP，DIG-dUTP标记。
- TUNEL测定（原位细胞凋亡的定位）。
- 末端转移酶依赖的PCR检测。
- 拖尾模板为单分子测序。
末端脱氧核苷酸转移酶（）催化DNA分子的3'-OH末端添加单核苷酸。不同于所有其他已知的DNA聚合酶， TdT催化的DNA合成没有模板指导。只需要有一个dNTP的聚合，尽管任何的dNTP（和衍生物）或一种dNTP的任何组合将作为底物1。突起，凹陷，或钝端的单链DNA或双链DNA分子将作为底物。在58.3 kDa的酶不具有5'-或3'-核酸外切酶的活性。添加Co 2 +，使尾部作用更加高效。
酶提供500和2500个单位，浓度为20 U /μL，同时提供10X反应缓冲液和2.5mM氯化钴
储存： -20℃的冰箱
储存缓冲液：50mM的Tris-HCl（pH 7.5）中含50％甘油，0.1M的NaCl，0.1mM的EDTA，1mM的DTT和0.1％的Triton®X-100。
单位定义： 1单位的酶定义为在37℃下使用寡核苷酸作为引物，在酸不溶介质中整合1 nmol dATP所需酶量。
活性测定： TdT酶活是在10μl的反应体系中测试的，该体系含有33毫摩尔Tris醋酸盐（pH 7.5），66 mM的醋酸钾，10mM的醋酸镁，0.5mM的DTT，1mM的的dATP，0.25mM的氯化钴，2 µM 20-mer DNA oligo和不同量的酶。
资料来源：大肠杆菌菌株携带从小牛胸腺克隆的末端转移酶基因。
末端转移酶10X反应缓冲液： 330毫摩尔Tris-醋酸盐（pH 7.5），660 mM的醋酸钾，100mM的醋酸镁，和5mM DTT。
储存缓冲液： 50mM的Tris-HCl（pH 7.5）中含50％甘油，0.1M的NaCl，0.1mM的EDTA，1mM的DTT和0.1％的Triton®X-100。
污染活性测定：末端转移酶是无外切和内切酶和RNA酶的活性。
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