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ExactSTART™ Full-Length cDNA Library Cloning Kit
ExactSTART™ Full-Length cDNA Library Cloning Kit
货号
ES0907
规格
10 Rxns
存储温度
-70℃
产品详情
ExactSTART™全长cDNA文库克隆试剂盒
应用
- 构建cDNA文库，代表从总RNA或者富集的mRNA中全长筛选的转录产物。
- 转录起始位点准确识别。
- 选择性剪切研究。
- 从全长选择转录产物制备二代测序模板。
该ExactSTART™全长cDNA文库克隆试剂盒能够通过最少1μg总RNA样品创建定向克隆的全长cDNA文库。
该试剂盒便于cDNA的唯一的全长多聚腺苷酸化RNA制备的选择性的克隆，由此能够精确识别5'末端的RNA转录物，包括它们精确的5'核苷酸。在此过程中，第一步是用烟草酸焦磷酸酶处理总RNA，将5'-加帽和5'-三磷酸化的RNA转录成单磷酸化的RNA。然后，所有的5'-单磷酸化的RNA分子作为供体用于连接到RNA受体寡核苷酸，从而标记其5'末端。用寡聚（dT） - 含在合成第一链cDNA分子具有寡（dT）引物标记其5'末端和另一标记是互补的引物结果反向5'-标记的RNA分子的转录RNA受体寡核苷酸在其3'端（图1）。在第一链cDNA的5'和3'标签提供吸位点的PCR扩增。双标记的，PCR扩增的双链DNA产物可用于产生用于测序的模板或者生成标记的靶cDNA微阵列表达分析。可选地，它们可以被克隆到包含在试剂盒中，用于产生一个完整长度的选择的cDNA文库的载体。
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优点：
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图1。ExactSTART™全长cDNA文库克隆过程示意图。简化的实验步骤可以在2日内完成文库构建。 |
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图2。ExactStart™cDNA文库筛选转录 起始位点和多聚腺苷酸化在S. cerevisiae. 红，5'和3'标记序列; 蓝色，典型的基因序列; 绿色，典型基因和ExactStart克隆序列之间的差异。所有绿色的序列被确定为从基因组DNA，而不是虚假的序列导出。 |
*专利申请中。
| Catalog No. | Size |
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| ExactSTART™ Full-Length cDNA Library Cloning Kit | |
| ES0907 | 10 Reactions |
| Contents: 10X TAP Buffer, Tobacco Acid Pyrophosphatase (TAP), RNase Inhibitor, 10X Ligase and RT Buffer, 20X TAP Stop Buffer, RNA Acceptor Oligo, ATP Solution, RNA Ligase, 1st-Strand Primer, dNTP mix, MMLV-RT, RNase Mix, PCR Primer 1, PCR Primer 2, Fast-Link™ 10X Ligase Buffer, Fast-Link™ DNA Ligase, 10 mM ATP Solution, cDNA Cloning Vector, Nuclease-Free Water, DNA Fragment 2X Precipitation Solution, ExactSTART™ RNA Control Transcript. | |
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