Exonuclease I

Exonuclease I


货号

X40505K


规格

5,000 U


存储温度

-20℃


产品详情


Exonuclease I, E. coli
应用

  • 除去残留的单链DNA,包括反应混合物中的寡核苷酸。
  • 从核酸混合物去除单链DNA。

外切核酸酶I可按照3'→5'方向消化单链DNA 1-3,但并不消化双链DNA。虽然它需要镁离子的存在和游离的3'-羟基末端的活性,它在广泛的buffer条件下具有活性,可直接添加到大多数反应混合物中,80℃下温育15分钟热灭活。
单位定义:一个单位的 外切核酸酶定义为37℃标准反应条件下,30分钟内从热变性的小牛胸腺DNA催化释放10 nmo酸溶核苷酸所需要的酶量。
储存缓冲液: 50mM的Tris-HCl(pH 7.5)中含50%甘油,0.1M的NaCl,0.1mM的EDTA,1mM的DTT和0.1%的Triton®X-100。
质量控制:核酸外切酶I通过降解的单链DNA测试,不具有RNA酶,核酸内切酶和双链外切酶活性。

 

图1. 核酸外切酶I对单链DNA的特殊活性。 
200 ng  EcoR I-线性化的 pUC19 双链DNA 和 1 µg 100-mer单链DNA寡核苷酸混合在 1X TA Buffer 中,在有10单位外切酶和没有外切酶的体系中,37°C 20 min,1% 琼脂糖电泳检测,Exonuclease I完全消化了单链DNA寡核苷酸,但是留下了线性化的质粒双链DNA。泳道1, size markers; 泳道 2, minus Exo I; Lane 3, plus Exo I.

. http://www.epibio.com/images/default-source/product-page-images/exoi.jpg?sfvrsn=0.9560400747803741

 

 

References

  1. Lehman, I.R. and Nussbaum, A.L. (1964) J. Biol. Chem. 239, 2628.
  2. Kushner, S.R. et al. (1971) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 68, 824.
  3. Kushner, S.R. et al. (1972) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 69, 1366.
 

 

 

Catalog No. Concentration Size

Exonuclease I, E. coli
X40501K 20 U/µl 1,000 Units
X40505K 20 U/µl 5,000 Units
X40520K 20 U/µl 20,000 Units