APex™ Heat-Labile Alkaline Phosphatase

APex™ Heat-Labile Alkaline Phosphatase


货号

AP49100


规格

100 Rxns


存储温度

-20℃


产品详情


APex™ Heat-Labile Alkaline Phosphatase
应用

  • 克隆前对DNA载体进行去磷酸化,防止自连.
  • 通过多聚核苷激酶制备5´-核酸末端,用于5´-end标记.
  • 对DNA/RNA底物进行去磷酸化用于其它目的.

APex™ Heat-Labile Alkaline Phosphatase是一种创新的酶制剂,活性超过其它的耐热碱性磷酸酶。该酶通过重组获得,具有高纯度并不含核酸酶污染。APex Alkaline Phosphatase批次十分稳定,可以从所有类型的DNA末端(5´悬浮,平端,5´凹陷端,RNA末端)去除5´-磷酸基。70°C ,加热5分钟可灭活该酶。

 

APex Phosphatase可以直接加入到大部分的限制性内切酶缓冲液中,在高至50°C 、不同盐浓度(如1 M Na+, NH4+, K+, Cl-, or OAc-)、10% Triton® X-100等条件下同样具有高活性。 去除DNA, RNA或核苷的5´-磷酸化,只需要将底物与APex Phosphatase在37°C孵育10分钟即可。相同的反应条件也适用于所有类型(包括5´凹陷端)的DNA末端.
活力单位定义1微升的APex Heat-Labile Alkaline Phosphatase能够在37°C,10分钟将1 µg的Hind III,Hinc II或Pst I消化的pUC19载体DNA脱磷酸。
储存缓冲液: 50%甘油含有50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 0.1 mM醋酸锌, 10 mM MgCl2, 0.1 M NaCl和0.1% Triton® X-100.
10X反应缓冲液330 mM Tris-acetate (pH 7.5), 660 mM醋酸钾, 100 mM 醋酸镁和5.0 mM DTT.
质量控制: 基于功能检测满足Epicentre的克隆标准,去磷酸化后95%的DNA不能自连。'不含核酸外切、内切酶活性和RNase活性.

 

Table 1. 限制性内切酶悬浮端检测

5´-悬浮

5´-(4-base) 悬浮:

Hind III, EcoR I

5´-(3-base) 悬浮:

EcoO109 I

5´-(2-base) 悬浮:

Nde I

平端Sma I, Ssp I

5´-缩进

3´-(4-base) 悬浮:

Sph I, Sac I, Pst I

3´-(3-base) 悬浮:

AlwN I

3´-(1-base) 悬浮:

Ahd I

 

 

Catalog No. Concentration      Size 
AP49100 1 Reaction/µl 100 Reactions