Transformation & Storage Solution

Transformation & Storage Solution


货号

C905ML


规格

5 ml


存储温度

-20℃


产品详情


Transformation & Storage Solution

  • 制备大肠杆菌的感受态细胞用于转化。

转化和存储溶液(TSS),在美国卫生研究院研制,使研究人员能够一步完成制备感受态的大肠杆菌并且可以不需要热击转化。与其他制备感受态的细胞(传统的CaCl2 方法)相比,TSS被认为是比较高效的方法。

转化效率依赖于大肠杆菌菌株,以及转化DNA的性质和质量。例如大肠杆菌株 DH1, DH5α, HB101, JM109, LE392, MM294, SCS-1,和XL1-Blue的转化效率是介于1.5×10 7至1.0×10 8 /微克的DNA之间。
优点

  • 单步制备感受态细胞中。
  • 制备的细胞在-70℃下储存,其转化效率几乎没有损失。
  • 转化细胞无需热击。
  • 通常可获得106 -10 8 /微克DNA的转化效率。

储存缓冲液:TSS提供一个现成的2X缓冲液。
质量控制:TSS已使用大肠杆菌菌株试验测试了转化效率。

表1使用TSS转化大肠杆菌的说明

  1. 在1.5ml微量离心管沉淀1毫升细胞A600?0.3。
  2. 除去上清液,加入冰冷的1X TSS0.1毫升,轻轻重悬细胞。细胞可以在此时被冷冻并储存在-70℃以备后用。
  3. 添加 100 pg-10 ng 的转化DNA。
  4. 混合的细胞和DNA,并放置冰上10分钟,然后在室温下搅拌10分钟,然后再在冰上10分钟。
  5. 加入1 ml的LB培养基中, 37℃下孵育1小时。
  6. 选择培养基或其他培养基培养该细胞。

参考文献

  1. Chung, C.T. et al. (1989) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86, 2172.
  2. Sambrook, J. et al. (1989) in: Molecular Cloning: A Laboratory Manual (2nd ed.), Cold Spring Harbor Press, New York.
  3. Hondal, R. and Schaeffer, C. (1995) Epicentre Forum 2(3), 5.
 Catalog No. Size

Transformation & Storage Solution (TSS)
   C905ML 5 ml