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GELase™ Agarose Gel-Digesting Prep

货号

G09100

规格

100 U @ 1 U/μl

存储温度

-20℃

产品详情

GELase™ Agarose Gel-Digesting Preparation

应用

回收琼脂糖凝胶核酸用于：限制酶图谱; 克隆; 标签; DNA测序;转化YAC， BAC，粘粒，fosmid，和质粒载体; 显微注射;和扩增反应。

GELase™ Agarose Gel-Digesting Preparation 含有一个独特的epicentre β- 琼脂糖消化酶，可简单，保证质量的从低熔点琼脂糖凝胶中回收完整的DNA 或RNA. 无论电泳缓冲液是TAE，TBE，MOPS或磷酸缓冲液等。胶可以直接在电泳缓冲液中融化也可以在电泳缓冲液中加入溶胶酶buffer或直接在溶胶酶buffer中溶胶，这样溶胶酶活性会更高。
溶胶酶可溶解琼脂糖的碳骨架，释放小分子量，可溶的寡糖分子。消化的胶溶液中DNA用醋酸氨沉淀或乙醇沉淀。胶消化产物是乙醇可溶的。
好处：

DNA或RNA的回收率接近100% (图1).
纯化大片段DNA或RNA，如上兆的碱基，可保证完整的生物活性。
简单，灵活的操作，减少操作时间。
典型的TAE溶解的200毫克的胶，用3个单位GELase在不到10分钟内就可被消化。
比其他凝胶消化酶活性更强。
比离心柱或其他凝胶消化的方法更经济。
提供两种便捷的包装：1 U /μL的标准反应和0.2 U /μL包装适用于小的凝胶样品，比较经济，但需要延长消化时间。

单位定义:一个单位的GELase 定义为45°C 条件下，GELase Buffer中1小时内制备600mg溶解在1% LMP琼脂糖凝胶DNA所需要的酶量。
储存 Buffer: 50% glycerol含有50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 0.1 mM EDTA, 0.1 M NaCl, 0.1% Triton X-100, and 1 mM DTT.
质量控制：每批GELase制备液中未检测到 DNA核酸外切酶，核酸内切酶，核糖核酸酶的活性。
注意:

一个单位GELase制备液等于3个或更多个单位的大多数其他凝胶消化酶。
我们建议添加乙酸铵对核酸沉淀，因为不是由乙酸铵的存在下用乙醇沉淀GELase制备液和大多数其它蛋白。而是所述的消化产物中的寡糖，在乙酸铵的存在下在乙醇中溶解度较高。为了您的方便，提供您5 M醋酸铵溶液，可随时使用。

参考文献

Kirkpatrick, H.A. et al. (1997) Epicentre Forum 4(3), 11.
Sasaki, H. and Hogan, B.L. (1994) Cell 76, 103.
Schedl, A. et al. (1993) Nature 362, 258.
Woo, S.S. et al. (1994) Nucleic Acids Res. 22, 4922.
Steck, T.R. (1994) BioTechniques 17, 676.
Chen, L. et al. (1994) BioTechniques 16, 228.

图1，使用GELase™ Gel-Digesting Preparation 回收任何大小的DNA，回收率接近100%。实验1，DNA大小从63 bp到7.9 kb，用1.5%琼脂糖胶分离（A1），用GELase回收后再使用1.5%琼脂糖胶分析，EB染色(B1)。实验2，高分子量的大豆DNA用1% LMP-琼脂糖胶通过脉冲场电泳分离(A2)。2.2 Mb DNA条带通过溶胶酶纯化并通过1%琼脂糖胶分析，EB染色(B2).

Units of GELase™ Preparation	Digestion Time
3.0	8 min
2.0	15 min
1.0	30 min
0.33	60 min

表1. 消化TAEbuffer溶解的200毫克1%LMP琼脂糖所需要的时间 。

图2 . GELase 操作流程是简便，弹性的，可提供最大的活性和最快的操作速度。

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