T4 DNA Polymerase

T4 DNA Polymerase


货号

D0605H


规格

500 U


存储温度

-20℃


产品详情


T4 DNA Polymerase
T4 DNA 聚合酶
应用:

  • 转化5'-和3'-突出末端为平末端。
  • 克隆PCR片段。用T4 DNA聚合酶和dNTP处理含3'-A突出端的PCR产物至平末端,从而大大提高了克隆效率。
  • 产生位点特异性突变,因为T4 DNA聚合酶不能置换被杂交到DNA的寡核苷酸,它可用于位点特异性突变,通过杂交到单链DNA模板的“突变”寡核苷酸引物延伸来实现。
  •  标记DNA分子3'末端,并使用T4 DNA聚合酶的核酸外切酶和聚合酶活性合成特异链的探针

T4 DNA聚合酶同时具有DNA依赖性DNA聚合酶活性和强效的3'→5'外切酶活性。这些特点使这种酶可用于多种分子生物学应用。

 

单位定义: T 4 DNA聚合酶的一个单位定义为37℃标准测定条件下30分钟内在酸性不容介质中转化10nmol的dNTP所需酶量。
储存缓冲液:50mM的Tris-HCl(pH 7.5)中含50%甘油,0.1M的NaCl,0.1mM的EDTA,1mM的DTT和0.1%的Triton®X-100。
T4 DNA聚合酶10X反应缓冲液: 330毫摩尔Tris-醋酸盐(pH 7.5),660 mM的醋酸钾,100mM的醋酸镁,和5mM DTT。dNTP不包括在10X反应缓冲液中,可单独购买。
质量控制: T4 DNA聚合酶进行了DNA合成的测试,并且是不含有核酸内切酶和RNA酶的活性。

http://www.epibio.com/images/default-source/product-page-images/t4dnapsi.jpg?sfvrsn=0.6398395347610744
1 T4 DNA聚合酶的核酸外切酶和聚合酶活性补平反应。用T4 DNA聚合酶在无dNTPs条件下与hindⅢ -消化的λ噬菌体DNA37℃条件下孵育不同时间,随培养时间延长片段大小变小。经过不同时间外切核苷酸的处理,每个反应等分后,加入200μMdNTP,反应10分钟以允许聚合酶补平反应发生,从而再生原始的DNA片段(泳道标记为加号)。

参考文献

  • Wang, K. et al. (1994) BioTechniques 17, 236
  • Sambrook, J. et al. (1989) in: Molecular Cloning: A Laboratory Manual (2nd ed.), Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York.
  • O'Farrell, P.H. et al. (1980) Mol. Gen. Genetics 179, 421.
Catalog No. Concentration Size

T4 DNA Polymerase
   D0602H 5 U/µl 200 Units
   D0605H 5 U/µl 500 Units

Includes 10X Reaction Buffer.

T4 DNA Polymerase is also available in bulk. Please inquire.