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E.coli DNA Ligase
E.coli DNA Ligase
货号
DL04082H
规格
200 U @ 10 U/μl
存储温度
-20℃
产品详情
E. coli DNA Ligase
应用
- 双链DNA的分子粘性末端克隆。
- 平末端连接，需要有10％-15％PEG和高浓度的一价阳离子的存在。
- CDNA第二条链合成产物的CDNA克隆。
大肠杆菌DNA连接酶是一个NAD+-依赖的酶，可催化双链DNA互补的3'-羟基和5'-磷酰基末端之间形成磷酸二酯键，酶最适用于粘性末端的双链DNA，在DNA切口处也比较活跃。平末端的连接需要有缩合剂的存在，如聚乙二醇或聚蔗糖®的存在，随酶附带一个10X反应缓冲液。
单位定义：一个单位的DNA连接酶被定义为标准条件下，16℃30分钟内连接hindⅢ消化的λ噬菌体DNA（5'末端的DNA为0.12μM，300μg/ ml的浓度）（> 50％）所需要的酶量。
储存缓冲液： 50mM的Tris-HCl（pH值7.5）含50％甘油，0.1mM的EDTA，1mM的DTT，0.1M NaCl和0.1％的Triton®X-100。
10X反应缓冲液： 0.3M的Tris-盐酸（pH8.0）中，40毫摩尔MgCl 2，100mM的（NH 4）2 SO 4，12mM的EDTA，和1mMβ-NAD。
质量控制：大肠杆菌 DNA连接酶进行测试，未检测出污染DNA外切和内切核酸酶，核糖核酸酶活性。
| Catalog No. | Concentration | Size |
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| E. coli DNA Ligase | ||
| DL04082H | 10 U/µl | 200 Units |
| Includes 10X Reaction Buffer. | ||
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