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T4 DNA Polymerase

货号

D0602H

规格

200 U

存储温度

-20℃

产品详情

T4 DNA Polymerase
T4 DNA 聚合酶
应用：

转化5'-和3'-突出末端为平末端。
克隆PCR片段。用T4 DNA聚合酶和dNTP处理含3'-A突出端的PCR产物至平末端，从而大大提高了克隆效率。
产生位点特异性突变，因为T4 DNA聚合酶不能置换被杂交到DNA的寡核苷酸，它可用于位点特异性突变，通过杂交到单链DNA模板的“突变”寡核苷酸引物延伸来实现。
标记DNA分子3'末端，并使用T4 DNA聚合酶的核酸外切酶和聚合酶活性合成特异链的探针

T4 DNA聚合酶同时具有DNA依赖性DNA聚合酶活性和强效的3'→5'外切酶活性。这些特点使这种酶可用于多种分子生物学应用。

单位定义： T 4 DNA聚合酶的一个单位定义为37℃标准测定条件下30分钟内在酸性不容介质中转化10nmol的dNTP所需酶量。
储存缓冲液：50mM的Tris-HCl（pH 7.5）中含50％甘油，0.1M的NaCl，0.1mM的EDTA，1mM的DTT和0.1％的Triton®X-100。
T4 DNA聚合酶10X反应缓冲液： 330毫摩尔Tris-醋酸盐（pH 7.5），660 mM的醋酸钾，100mM的醋酸镁，和5mM DTT。dNTP不包括在10X反应缓冲液中，可单独购买。
质量控制： T4 DNA聚合酶进行了DNA合成的测试，并且是不含有核酸内切酶和RNA酶的活性。

图1 T4 DNA聚合酶的核酸外切酶和聚合酶活性补平反应。用T4 DNA聚合酶在无dNTPs条件下与hindⅢ -消化的λ噬菌体DNA37℃条件下孵育不同时间，随培养时间延长片段大小变小。经过不同时间外切核苷酸的处理，每个反应等分后，加入200μMdNTP，反应10分钟以允许聚合酶补平反应发生，从而再生原始的DNA片段（泳道标记为加号）。

参考文献

Wang, K. et al. (1994) BioTechniques 17, 236
Sambrook, J. et al. (1989) in: Molecular Cloning: A Laboratory Manual (2nd ed.), Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York.
O'Farrell, P.H. et al. (1980) Mol. Gen. Genetics 179, 421.

Catalog No.	Concentration	Size

T4 DNA Polymerase
D0602H	5 U/µl	200 Units
D0605H	5 U/µl	500 Units
Includes 10X Reaction Buffer. T4 DNA Polymerase is also available in bulk. Please inquire.

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