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T4 RNA Ligase


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T4 RNA Ligase 2, Deletion Mutant
Applications

  • 制备cDNA文库用于小RNA转录组分析,如RNA-Seq.
  • 最佳的接头连接用于miRNA克隆.

T4 RNA Ligase 2, Deletion Mutant, 也称为T4Rnl2(1-249), 用于连接单链腺苷酸化的DNA或RNA寡核苷酸到小RNA上,便于克隆或下一代RNA测序。预先腺苷酸化的DNA或RNA 5´端连接至RNA的3´端。与全长的酶不同,T4Rnl2(1-249)不能在ATP存在时腺甘酸化底物的5´端。然而,可将预先激活的供体(App-DNA or App-RNA)连接到受体的3´端。因此,在没有ATP存在时,环化和其它不期望的反应不会发生。 
该酶有2,000单位和10,000单位两种规格(浓度为200 U/µl). 随酶提供10X反应缓冲液.
活力单位定义: 在标准反应条件下,37°C,30分钟,一个活力单位指完成50%的22-mer RNA和17-mer DNA的连接所需的酶量.
储存缓冲液: 50%甘油含有50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 0.1 M NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM dithiothreitol (DTT) 和0.1% Triton® X-100.
T4 RNA Ligase 2, Deletion Mutant, 10X反应缓冲液: 500 mM Tris-HCl (pH 7.5), 20 mM MgCl2和10 mM DTT.
活性测定: 活力单位的测定在含有50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 2 mM MgCl2, 1 mM DTT和0.4 µg的等摩尔22-mer, 17-mer和39-mer的寡核苷酸和不同量的酶的体系下进行.
质量控制: T4 RNA Ligase 2, Deletion Mutant不含DNA外切和内切核酸酶和RNA酶活性。