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MonsterScript™ 1st-Strand cDNA Synthesis Kit
MonsterScript™ 1st-Strand cDNA Synthesis Kit
货号
MS041050
规格
50 Rxns
存储温度
-20℃
产品详情
MonsterScript™ 1st-Strand cDNA Synthesis Kit
MonsterScript™ Reverse Transcriptase
应用
- 第一链cDNA合成用于后续的PCR或实时PCR
- 通过RT-PCR验证芯片实验的基因表达数据
- RNA干扰进行基因沉默后的RT-PCR验证和定量
- 制备标记的cDNA探针
MonsterScript™ Reverse Transcriptase是一个热稳定的反转录酶完全不含RNase H活性。无RNase H活性，相比其它反转录酶，能够更加有效促进更长的cDNA和全长的第一链cDNA分子库的构建。Epicentre已证实MonsterScript™ Reverse Transcriptase能够进行15-kb RNA 模板的反转录合成(Fig. 1)。
MonsterScript 1st-Strand cDNA Synthesis Kit包含了MonsterScript RT PreMix，含有优化浓度的dNTPs, Mg2+和甜菜碱。甜菜碱能够减少反转录酶的暂停和终止，有利于复杂结构（如高GC）片段的反转录。试剂盒同时含有oligo(dT)和九聚体随机引物。
优点
- 无RNase H活性，有效提升使用随机引物从长的mRNA合成全长cDNA的能力
- 对热稳定，能够在高于50°C条件下进行反转录，该温度能够减少RNA二级结构并提升引物特异性
- MonsterScript RT PreMix含有优化的浓度的dNTPs, Mg2+和甜菜碱浓度，提升表现力
- 试剂盒含有oligo(dT)和随机九聚体引物，保证最大的转录覆盖率
- 可以从皮克量级的总RNA合成cDNA (Fig. 2).
- 试剂盒含有高效的RNase抑制剂，保证模板RNA的完整性
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Figure 1. MonsterScript™ Reverse Transcriptase从长于15kb的mRNA合成全长的cDNA。 通过MonsterScript 标准反应体系，从HeLa细胞总RNA中 ≈15.2-kb HGNEFp532 mRNA进行反转录。 PCR扩增HGNEFp532 mRNA反转录产物cDNA的5´端1.3-kb区域 (A). 1.3-kb产物的电泳分析(B)。 |
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Figure 2. MonsterScript™ Reverse Transcriptase在20-µl体系下，反转录六个不同稀释浓度的RNA至cDNA。10微升的每个反应产物用于50-µl体系 real-time PCR反应。使用Epicentre'sTAQurate™ GREEN Real-Time PCR MasterMix试剂盒。反应达到了99.4％的PCR效率和1.000的相关系数。 |
Product Citations
- Alice, A.F. et al. (2006) J. Bacteriol.188, 1551.
- Budde, P.P. et al. (2007) J. Bacteriol.189, 491.
- Conejo, M. et al. (2008) J. Molec. Evolution66, 11.
- Chumely, M.J. et al. (2007) J. Neurosci.27, 13481.
- Borchert, G.M. (2006) Nature Struct. Mol. Biol.13, 1097.
| Catalog No. | Size |
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| MonsterScript™ 1st-Strand cDNA Synthesis Kit | |
| MS040910 | 10 Reactions |
| MS041050 | 50 Reactions |
| Contents: MonsterScript™ Reverse Transcriptase (50 U/µl) with RNase Inhibitor, MonsterScript™ 5X cDNA PreMix (contains buffer, dNTPs, and betaine*), V3-Oligo(dT)21 Primer (10 µM), Random 9-mer Primers, RNase-Free Water. | |
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| MonsterScript™ Reverse Transcriptase | |
| MSTA5110 | 10 Reactions |
| MSTA5124 | 24 Reactions |
| Includes MonsterScript™ 5X Reaction Buffer. | |
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