最新产品
RecBCD Nuclease, E.coli
RecBCD Nuclease, E.coli
货号
BCD0401K
规格
1,000 U
存储温度
-20℃
产品详情
RecBCD Nuclease, E.coli
应用
- 去除质粒,粘粒,粘粒和BAC克隆或载体制备污染的细菌染色体DNA。
RecBCD核酸酶是来自大肠杆菌的外切核酸酶,可降解单链DNA双链DNA。DNA的水解作用是双向的,可以从3'和5'端开始,产生单磷酸核苷。镁是核酸外切酶发挥活性必需的,而而钙,镍,锌,铜可抑制核酸外切酶的活性。钙使双链DNA展开(具有解旋酶的活性)不水解。
单位定义: 一个单位的RecBCD核酸酶是指37℃在含1mM ATP 1X反应缓冲液,30分钟内降解1nmol的脱氧核糖核苷酸的线性双链DNA所需要的酶量。
储存缓冲液: RecBCD核酸酶是在含有50mM的Tris-HCl(pH 7.5)中,0.1M的NaCl,0.1mM的EDTA,1mM的DTT和0.1%的Triton?X-100,50%甘油溶液中供给。
10X反应缓冲液: 330毫摩尔Tris-醋酸盐(pH 7.5),660 mM的醋酸钾,100mM的醋酸镁,和5.0 mM的DTT。RecBCD核酸酶发挥活性需要ATP,应该被添加到1mM的终浓度。
质量控制: RecBCD核酸酶是未检测到蛋白酶,核糖核酸酶和双链特异性核酸内切酶的活性。
参考文献
- Eichler, D.C. and Lehman, I.R. (1977) J. Biol. Chem. 252, 499.
- Smith, G.R. (1990) Nucleic Acids Mol. Biol. 4, 78.
- Taylor, A. and Smith, G.R. (1980) Cell 22, 447.
Catalog No. | Concentration | Size |
|
||
RecBCD Nuclease, E. coli | ||
BCD0401K | 10 U/µl | 1,000 Units |
|
||
ATP Solution | ||
R109AT | 10 mM | 5 µmol |
RA02825 | 100 mM | 25 µmol |